Laboratory worker examining a green substance on a petri dish while conducting coronavirus research

Thời gian nuôi cấy tiền tăng sinh (hay còn gọi là nuôi cấy sơ cấp) và tăng sinh chọn lọc (còn gọi là nuôi cấy thứ cấp) thường mất đến hơn 32 giờ. Do đó, việc chuẩn bị môi trường nuôi cấy an toàn và hiệu quả là một phần quan trọng trong quá trình sinh trưởng của tế bào và vi sinh vật trong phòng thí nghiệm. Để đảm bảo việc kiểm soát chất lượng môi trường nuôi cấy được thực hiện nhanh chóng và chính xác, DKSH cung cấp những đĩa môi trường nuôi cấy sẵn, sử dụng để phát hiện Salmonella và Listeria.

Salmonella

Sản phẩm phát hiện Salmonella theo tiêu chuẩn EN-ISO 6579: 2002

  • Dung dịch đệm peptone (tăng sinh không chọn lọc)
  • Canh Rappaport Vassiliadis (tăng sinh có chọn lọc)
  • XLD và một số loại Agar khác: Hektoen Enteric Agar, Brilliant Green Agar, SS-Agar và môi trường nuôi cấy tạo màu như Salmonella Chromogen Agar hoặc HiCrome Salmonella Agar.

Listeria monocytogenes và Listeria spp

Sản phẩm phát hiện Listeria theo tiêu chuẩn EN ISO 11290-1: 2017:

  • Tăng vi sinh sơ cấp trong môi trường half-Fraser: 25 giờ ± 1 giờ
  • Tăng vi sinh thứ cấp trong môi trường Fraser: 24 giờ ± 2 giờ
  • Dịch nuôi cấy half-Fraser và Fraser có thể được bảo quản lạnh trước khi cấy chuyền hoặc phân lập trên thạch chọn lọc tối đa 72 giờ
  • Các đĩa petri đã cấy vi sinh có thể được bảo quản lạnh tối đa hai ngày trước khi đọc kết quả
  • Có thể kiểm tra lại dưới kính hiển vi đối với vi khuẩn Listeria spp gây bệnh
  • Có thể thực hiện thêm thử nghiệm CAMP và Catalase
  • Được trang bị đặc tính mới với hiệu suất cao

The procedure of Salmonella culture

The procedure of Listeria culture

Môi trường nuôi cấy tạo màu này chứa các phân tử không màu hòa tan được gọi là chất tạo màu – chromogens, bao gồm cơ chất mục tiêu cho enzyme hoạt động cụ thể của vi sinh vật và chromophore – nhóm mang màu. Khi liên kết giữa chất nền và chromophore bị phân tách bởi một enzyme cụ thể do vi sinh vật mục tiêu tạo ra, thì chromophore sẽ được giải phóng. Ở dạng không liên hợp, chromophore thể hiện sắc tố màu đặc biệt đồng thời tạo thành kết tủa do khả năng hòa tan của hợp chất giảm.

Kiểm nghiệm phát hiện vi khuẩn dựa trên kháng thể

Phương pháp này dựa trên nguyên lý kháng thể có độ nhạy và đặc hiệu cao đối với kháng nguyên hiện diện trên vi sinh vật cần kiểm nghiệm. Hầu hết các kháng nguyên đều chứa trình tự axit amin đặc thù, có thể phân biệt chúng với các kháng nguyên khác. Tính đặc hiệu và độ nhạy giữa kháng nguyên và kháng thể cho phép phát hiện vi sinh vật mục tiêu dựa trên kháng thể đã được xác định trước.

Xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với enzym (ELISA):

Xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với enzym là một trong những giải pháp phát hiện vi sinh vật gây bệnh mục tiêu một cách chuẩn xác, hệ thống phát hiện của xét nghiệm hấp thụ miễn dịch được tạo ra dựa trên các thuốc thử đã được đánh dấu bằng hợp chất enzym.

Các nhà khoa học đã phát triển các phương pháp dựa trên axit nucleic để phát hiện và xác định trình tự DNA hoặc RNA cụ thể của vi sinh gây bệnh mục tiêu. Việc phát hiện trình tự axit nucleic đích được thực hiện bằng phản ứng chuỗi polymerase đơn giản (PCR). Phương pháp này thường được ứng dụng phổ biến trong phát hiện vi sinh gây bệnh trên thủy sản.

Real-time PCR kết hợp tính đặc hiệu của PCR thông thường với phép đo định lượng huỳnh quang để theo dõi sự khuếch đại của các gen cụ thể trong vi sinh gây bệnh mục tiêu. Một số chương trình qPCR đã được thiết kế riêng biệt với mục đích phát hiện các gen mục tiêu như gen độc tố tả (ctxA) của V. cholerae hoặc gen tdh/ trh của V. parahaemolyticus trong các mẫu cá và các loài giáp xác. Việc phát hiện nhiều gen mục tiêu của các loài, kiểu huyết thanh của vi sinh vật hoặc các loài có liên quan khác có thể được thực hiện trong một phản ứng duy nhất bằng xét nghiệm đa gen.

Khuếch đại đẳng nhiệt qua trung gian vòng lặp (LAMP) là một phương pháp biến thể khác của các phương pháp dựa trên axit nucleic. Hầu hết các xét nghiệm dựa trên LAMP đã được sử dụng để phát hiện V. parahaemolyticus, V. vulnificus, Salmonella spp., Và L. monocytogenes trong các mẫu hải sản và môi trường. LAMP được chứng minh là đặc hiệu và nhạy hơn so với các xét nghiệm dựa trên PCR khác để phát hiện mầm bệnh từ thực phẩm.

Dr. Kitiya Vongkamjan